百迪雜交瘤無血清培養(yǎng)基1000ml
- 品名： 百迪雜交瘤無血清培養(yǎng)基1000ml
- 型號： S109-1000
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
產(chǎn)品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | 直接適應(yīng) 1. 預(yù)熱無血清培養(yǎng)基及添加劑，將添加劑按1：10的比例添加至無血清培養(yǎng)基，配制成雜交瘤完全培養(yǎng)基，雜交瘤細(xì)胞傳代至完全培養(yǎng)基。在適應(yīng)過程中，細(xì)胞傳代密度應(yīng)是正常傳代密度的兩倍。 2. 監(jiān)測細(xì)胞生長，直到活細(xì)胞密度達(dá)到1×106個(gè)活細(xì)胞/mL。在新鮮預(yù)熱的雜交瘤完全培養(yǎng)基中傳代至活細(xì)胞密度為1-2×105個(gè)活細(xì)胞/mL。 3. 繼續(xù)監(jiān)測和傳代細(xì)胞3-5代，細(xì)胞倍增時(shí)間不低于之前培養(yǎng)基時(shí)，認(rèn)為此步驟培養(yǎng)基適應(yīng)已經(jīng)完成。 連續(xù)適應(yīng) 1. 將原培養(yǎng)基與雜交瘤完全培養(yǎng)基以3：1的比例混合，雜交瘤細(xì)胞接種至新鮮預(yù)熱的混合后培養(yǎng)基。在適應(yīng)過程中，傳代密度應(yīng)是正常傳代密度的兩倍。 2. 監(jiān)測細(xì)胞生長，直到活細(xì)胞密度達(dá)到1 × 106個(gè)活細(xì)胞/mL。將原培養(yǎng)基的比例逐步減少 （1：1，1：3，1：9），直至雜交瘤細(xì)胞接種于100%的雜交瘤完全培養(yǎng)基。傳代密度為1-2x105個(gè)活細(xì)胞/ml。 3. 繼續(xù)監(jiān)測和傳代細(xì)胞，在100%完整的雜交瘤完全培養(yǎng)基中持續(xù)生長和存活幾代后，細(xì)胞倍增時(shí)間不低于之前培養(yǎng)基時(shí)，認(rèn)為此步驟培養(yǎng)基適應(yīng)已經(jīng)完成。 蛋白表達(dá) 1. 雜交瘤細(xì)胞接種密度0.5-1×106 /mL， 培養(yǎng)溫度36.5~37.0℃，pH:7.1±0.2，DO： 40%。（搖床中建議轉(zhuǎn)速120rpm，振幅50mm, 5-8%CO2 ）。 2. 第一次補(bǔ)料：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到2.5×106 /mL或培養(yǎng)48h時(shí)開始補(bǔ)第一次料：3%補(bǔ)料 +4mM谷氨酰胺，葡萄糖控制到4g/L； 3. 第二次補(bǔ)料：當(dāng)培養(yǎng)至96h時(shí)補(bǔ)第二次料：3%補(bǔ)料+4mM谷氨酰胺，葡萄糖控制到4g/L；當(dāng)細(xì)胞活率低于50%時(shí)，培養(yǎng)結(jié)束； |
| 注意事項(xiàng) | 1. 本產(chǎn)品使用過程中應(yīng)注意無菌操作，避免污染。 2. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴(yán)禁使用。 3. 為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果，請勿進(jìn)行凍融處理； 4. 禁止使用超出規(guī)定有效期的產(chǎn)品。 5. 由于本培養(yǎng)基含有谷氨酰胺，因此建議液體培養(yǎng)基超過3個(gè)月時(shí)補(bǔ)加2-4 mM谷氨酰胺。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 2℃-8°C避光保存，有效期12個(gè)月。 |
產(chǎn)品詳情
BDBIO 雜交瘤無血清培養(yǎng)基是一種無動(dòng)物源，化學(xué)成分限定培養(yǎng)基。雜交瘤無血清培養(yǎng)基為初始培養(yǎng)基，含有4mM的谷氨酰胺，為雜交瘤細(xì)胞生長提供均衡的營養(yǎng)，與雜交瘤添加劑搭配使用可支持雜交瘤細(xì)胞的高密度培養(yǎng)。適用于人、小鼠和大鼠雜交瘤及骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)、單克隆抗體和重組蛋白的表達(dá)。
暫無內(nèi)容...
